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Sumo protease

Q:SUMO蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)

A:SUMO Protease(SUMO蛋白酶,又稱ULP蛋白酶)能夠識(shí)別并且高效地將SUMO(Small Ubiquitin-Like Modifier)從融合蛋白上切割下來(lái)。


Q:相比EK和TEV,SUMO蛋白酶的優(yōu)勢(shì)

A:相對(duì)于EK和TEV等蛋白酶的短小識(shí)別位點(diǎn),SUMO蛋白酶能夠識(shí)別完整的SUMO序列,所以SUMO蛋白酶酶切反應(yīng)有很高的特異性,且在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中保持較高的活力,例如溫度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。



Q:sumo蛋白酶如何去除

A:SUMO蛋白酶具有多聚His標(biāo)簽,便于融合蛋白切割后用NI-NTA(產(chǎn)品貨號(hào)PAN001)去除。


Q:SUMO Protease來(lái)源

A:自E.coli表達(dá)經(jīng)親和純化的重組蛋白酶。


Q:酶活性單位定義

A:在30℃條件下反應(yīng)1小時(shí),能夠切割5ug的反應(yīng)底物達(dá)90%以上所需的酶量定義為一個(gè)活性單位。


Q:推薦反應(yīng)體系

A:

反應(yīng)物組成 體積
SUMO融合蛋白 100ug
SUMO Protease 2ul(10U/ul)
10*SUMO Protease Buffer 10ul
ddH2O 至100ul

Q:不同溫度下的參考反應(yīng)時(shí)間

A:

1、4℃反應(yīng)15~16小時(shí)
2、16℃反應(yīng)4小時(shí)
3、25℃反應(yīng)1.5小時(shí)
4、30℃反應(yīng)1小時(shí)


Q:蛋白酶純度

A:>95%,as determined by SDS-PAGE


Q:是否耐受2M尿素

A:耐受


Q:酶切效率如何?

A:sumo蛋白酶酶切特異性和酶切效率都表現(xiàn)優(yōu)異


Q:sumo蛋白酶能否在細(xì)胞裂解液中使用或者在活細(xì)胞的狀態(tài)下使用

A:sumo蛋白酶在蛋白中使用,用于切割標(biāo)簽。裂解液或活細(xì)胞的這兩種狀態(tài)都不推薦----雜質(zhì)太多,影響酶活性


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