Q:保真性
A:保保真性能顯著優(yōu)于普通 Taq 聚合酶,具有高保真擴增特性。
Q:延伸速率
A:在推薦的條件下大于每分鐘2kb
Q:活性定義
A:嗜熱菌DNA Polymerase的活性單位定義為:在推薦的緩沖反應體系中,以大馬哈魚精DNA為模板,68° 30分鐘內(nèi)合成10nmol核酸所需要的酶量為1活性單位
Q:質(zhì)量控制
A:經(jīng)酶切實驗檢測無外源核酸酶污染,PCR方法未檢測到宿主DNA殘留,-20°存放一年,無明顯活性喪失。
Q:貯存溶液
A:50mM Tris-HCL(PH 7.6),50mM KCL,1mM DTT,0.1mM EDTA,50%(v/v) glycerol
Q:dNTP注意事項
A:對于高保真酶,dNTP中雜質(zhì)強烈抑制聚合酶反應,請使用高質(zhì)量的dNTP
Q:引物長度
A:引物的適當長度為20-35bp;過長或者過短,需要優(yōu)化退火溫度;
Q:GC含量高
A:GC含量高的情況下,請使用GC buffer,對保真性沒有影響;擴增基因組或GC含量較高時,建議98°變性
Q:可參考PCR體系
A:
| KOD | 0.5-1ul |
| 2xKOD buffer | 10ul |
| dNTP(10mM each) | 0.5ul |
| Primers(10uM) | 1ul(各0.5ul) |
| 無菌H2O | Up to 20ul |
Q:可參考PCR程序(根據(jù)實際反應條件摸索優(yōu)化)
A:
| 95℃或98℃ 4min | 1Cycle |
| 95℃或98℃ 20s |
普通質(zhì)粒擴增(28 Cycles) 質(zhì)粒點突變(20 Cycles) cDNA模板擴增(28-35 Cycles) 末端補平(5 Cycles) |
| 52°(Tm-5℃) 20s | |
| 68℃ 1.5kb/min | |
| 68℃ 3min | (1 Cycle) |
Q:組分中是否含有Mg2+
A:buffer中含mg離子
本產(chǎn)品僅供科學研究使用,不得用于人體 / 動物醫(yī)療、診斷及臨床治療
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