^{Q：補償怎么做？}

^{A：補償信息內(nèi)容較多，如需文本，詳詢技術(shù)，我們會通過郵件發(fā)送給您。}

^{Q：如何用流式細胞儀分析}

^{A：流式細胞儀激發(fā)光采用激發(fā)波長488nm，發(fā)射波長530 nm 檢測FITC 和>575 nm 檢測PI。Annexin V-FITC 的綠色熒光通過FITC 通道（FL1）檢測；PI 紅色熒光通過PI 通道（FL3/FL2 建議使用FL3）檢測。}

^{Q：用流式細胞儀分析后最后的結(jié)果是什么樣}

^{A：細胞應(yīng)可分成三個亞群：正?；罴毎麅H有很低的熒光強度，凋亡細胞有較強的綠色熒光，壞死細胞有綠色和紅色熒光雙重染色。}

^Q：保存

^{A：4℃保存，Annexin V-FITC、PI 染色液需避光保存，半年有效。若長期保存，可以把PI 染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存，Annexin V-FITC 結(jié)合液可以直接-20℃保存。}

^{Q：所需試劑及儀器}

^{A：1. PBS
     2. 蒸餾水或去離子水
     3. 水平離心機
     4. 流式細胞儀或熒光顯微鏡
     5. 移液器}

^{Q：Annexin V FITC/PI雙染法凋亡流式細胞凋亡檢測試劑盒可以檢測哪些種類細胞}

^{A：該試劑盒只能檢測活細胞，而不能用于切片、擦刮、固定或浸潤細胞樣品的檢測}

^{Q：染色后如果時間比較長了會不會影響結(jié)果}

^{A：細胞凋亡是一種持續(xù)變化的動態(tài)過程，選擇合適的誘導(dǎo)時間對觀察凋亡比較重要。染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。}

^{Q：如果有細菌污染，有無影響}

^{A：如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果。}

^{Q：有殘留胰酶}

^{A：PBS 洗滌細胞，洗掉殘留的胰酶，否則殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，最終導(dǎo)致染色失敗。}

^{Q：觀察時間在多久之內(nèi)合適}

^{A：熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。}

^{Q：含有血小板的血液樣品是否需要處理}

^{A：檢測血液樣品時，如果含有血小板，請使用含有EDTA 的緩沖劑并200×g 離心洗去血小板。因為血小板含有PS，能與Annexin V 結(jié)合，從而干擾實驗結(jié)果。}

^{Q：血液樣品，用了EDTA的緩沖劑，有什么要注意的嗎？}

^{A：離心去血小板}

^{Q：試劑盒使用過程中對光有無要求}

^{A：Annexin V-FITC 和PI 是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光}

^{Q：種屬是豬，如何做同型對照}

^{A：我們目前的產(chǎn)品不需要同型對照}

^{Q：加了PI之后，不是在冰浴的情況下放置的，有無影響？感覺實驗結(jié)果不是很漂亮，是和這個有關(guān)嗎？}

^{A：建議冰浴。如果不冰浴會造成假陽性。}

^{Q：是否可做細胞周期檢測，是不是關(guān)掉一個通道就可以用另一通道測細胞周期}

^{A：建議不要做細胞周期實驗，Annexin V是會影響PI的度數(shù)的，即便關(guān)閉了一個通道，影響依然存在，如果說只用我們AV FITC/PI試劑盒中的PI也是不行的，PI的濃度不夠，沒有專門的細胞周期試劑盒中的PI濃度高，做出來結(jié)果會不好}

^{Q：是否可用于細胞爬片}

^{A：可以做，一般很少這樣做，都是用流式的方法}

^{Q：定量檢測凋亡率比較成熟的是哪些實驗方法？要能區(qū)分正常細胞，凋亡細胞和死亡細胞的。}

^{A：annxinV-FITC/PI雙染可以區(qū)分正常細胞，凋亡早期細胞，凋亡晚期細胞。}

^{Q：細胞凋亡實驗之前用的是EGFP PI雙染的，現(xiàn)在用的FITC PI雙染檢測細胞凋亡的試劑盒。流式細胞儀檢測的時候，兩個對比圖的十字門刻度位置是要一樣的嗎？兩個圖刻度不一樣的。這樣對比科學(xué)的嗎？}

^{A：不同熒光素之間沒有可比性，而且其電壓、補償不一定都一樣，沒有比較意義；同一次實驗中，只要樣品和同型對照或陰性對照的畫門一致就行}

^{Q:是否需要設(shè)置單陽管}

^{A:推薦設(shè)置}

^{Q:如何設(shè)置單陽管}

^{A:AnnxinV-FITC/PI雙染法測細胞凋亡。推薦設(shè)置單管陽性對照用于熒光補償，即樣本經(jīng)過同樣的處理方式，但是單獨用AnnexinV-FITC或PI單染細胞，然后上流式細胞儀，根據(jù)系統(tǒng)給出的數(shù)值設(shè)置熒光補償參數(shù)。}